低成本国产产品同样实现MSD的多重蛋白指标检测功能

采编：Admin 来源：互联网发布时间：2025-01-13 08:50:37

MSD超敏电化学发光技术由美国Meso Scale Discovery公司研发。与传统的ELISA相似,MSD也是通过双抗体夹心法来定量目标蛋白。但其独特之处在于其采用了石墨烯材质的电极板作为反应容器,这种材质能显著增加捕获抗体的固载量。同时利用SULFO-TAG(三联吡啶钌)替代传统的酶或荧光染料标记在检测抗体上,当电极板通电时,SULFO-TAG发生一系列氧化还原反应,产生光信号,随后被仪器内的CCD相机捕获。MSD是电化学和化学发光两个过程的结合,可将许多非特异信号予以排除,受样本性质的影响更小,对于各类生物学样本的兼容度高。MSD的一大特点是超高的灵敏度及更宽的线性范围,主要原因是使用石墨烯底板使得抗体包被量比常规孔板提高10倍的同时,增加试剂和耗材的成本,操作步骤与传统ELISA类似,繁琐的人工操作步骤同样少不了。

芯弃疾JX-8B数字ELISA:单个样本加入到单个芯片孔,可同时测试2-6个检测项目;

芯弃疾JX-8B数字ELISA与传统免疫试验主要区别在于能够在飞升大小的孔中捕获单个分子,允许单个磁珠信号的数字化读取。用特异性抗体修饰的微珠捕获靶标生物标志物,在生物标志物浓度很少时,每个珠子能捕获一个或零个靶蛋白质分子,通过免疫反应后形成免疫复合物,然后用能够产生荧光产物的量子点报告信号。通过把单个珠子限定在飞升反应室中,通过微阱芯片结构“卡住”微珠,使得微珠阵列化排布的方式,使用荧光成像来检测单个格子的荧光信号进行最后定量。这种一个阵列化区域预埋一种特异性抗体修饰的微珠,一个通道内可以设计多个这样的阵列化区域,不同区域间预埋不同捕获抗体的微珠。这种基于酶联免疫吸附试验的数字化单分子检测方法(Digital ELISA)在几十微升的样品中检测到少至约 10-20个量子点标记的复合物。

数字 ELISA 试剂盒的优点

节省时间 - 从样品到结果只需30分钟

节省样本 - 只需低至10μL的样品体积

多重检测 - 同时检测10种生物靶标

高灵敏度 - 精确定量下限低至0.2pg/mL

高通量- 可选择4,8,16通道芯片同时检测

操作简便 - 全自动化仪器加样清洗,或者选择人工加样清洗

芯弃疾JX-8B与Luminex,MSD,Simoa,传统ELISA不同检测蛋白技术比较,在灵敏度,检测时间,检测成本上更显优势。

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芯弃疾JX-8B数字ELISA与MSD工作流程步骤的比较表。

MSD是基于Elisa原理的升级,但是加样步骤与传统ELISA类似,同样繁琐,耗时4-5h。

芯弃疾JX-8B数字ELISA试剂盒的5个步骤	MSD 试剂盒需8个大步骤
1.样本和标记抗体的量子点混合孵育5-10min	1.用至少150μL/孔的洗涤缓冲液清洗酶标板三次板
2.全自动化加样或者移液枪加样	2.每孔加入50μL/孔准备好的样品、校准品或对照品
3.孵育5-10min	3.用粘性封板膜密封酶标板,并在室温下摇动孵育2h
4.清洗10min	4.用至少150μL/孔的洗涤缓冲液清洗酶标板三次
5.拍照计数	5.每孔加入25μL检测抗体溶液。用粘性封板膜密封酶标板,并在室温下摇动孵育2h
	6.用至少150μL/孔的洗涤缓冲液清洗酶标板三次
	7.每孔加入150 μL的读数缓冲液
	8.使用MSD仪器分析酶标板

芯弃疾JX-8B数字ELISA与MSD工作流程步骤的比较表。

芯弃疾JX-8B数字ELISA试剂盒的5个步骤	MSD 试剂盒需8个大步骤
1.样本和标记抗体的量子点混合孵育5-10min	1.用至少150μL/孔的洗涤缓冲液清洗酶标板三次板
2.全自动化加样或者移液枪加样	2.每孔加入50μL/孔准备好的样品、校准品或对照品
3.孵育5-10min	3.用粘性封板膜密封酶标板,并在室温下摇动孵育2h
4.清洗10min	4.用至少150μL/孔的洗涤缓冲液清洗酶标板三次
5.拍照计数	5.每孔加入25μL检测抗体溶液。用粘性封板膜密封酶标板,并在室温下摇动孵育2h
	6.用至少150μL/孔的洗涤缓冲液清洗酶标板三次
	7.每孔加入150 μL的读数缓冲液
	8.使用MSD仪器分析酶标板

芯弃疾JX-8B与MSD主要参数对比

比较项目	芯弃疾JX-8B	MSD
检测下限	0.23 pg/mL	0.05 pg/mL
耗时	0.5 h	4-5 h
所需样品体积	10 μL	25 μL
理论重数	10	<10
线性范围	4 log	5～6 log
设备耗材成本	低(包括全自动加样仪+荧光扫描仪)	高